目的 探讨生物钟基因周期昼夜节律调节器1(period circadian regulator 1，PER1)与抑癌基因丝氨酸肽酶抑制因子Kazal 5型(serine peptidase inhibitor kazal type 5，SPINK5)在头颈鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC)中的表达特征及调控机制，解析PER1通过NF-κB通路调控SPINK5转录的分子作用。方法 基于癌症基因组图谱(TCGA)和GSE205155数据集筛选HNSCC差异基因，使用GEPIA数据库预测SPINK5与HNSCC患者预后的关联，应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫组化及Western blot检测SPINK5和PER1在60例临床样本中mRNA和蛋白表达水平；利用AMC-HN-8细胞系进行PER1敲低(siRNA)和过表达(质粒转染)，采用细胞划痕实验及细胞克隆实验探究PER1、SPINK5以及二者的联合效应对HNSCC细胞迁移能力及增殖能力的影响；Western-blot实验验证NF-κB对SPINK5的调控作用。结果 SPINK5和PER1在HNSCC组织中显著低表达(P均<0.01)，且低表达与患者不良预后相关(SPINK5生存分析HR=0.69，P=0.006 7)。PER1与SPINK5表达呈显著正相关(R~2=0.719 2，P=0.001 0)。敲低和过表达PER1分别可导致AMC-HN-8细胞中SPINK5 mRNA发生同步改变(P均<0.05)；敲低PER1可导致AMC-HN-8细胞迁移、增殖能力增强(P<0.05)，过表达SPINK5可导致AMC-HN-8细胞迁移、增殖能力减弱(P<0.01)，在敲低PER1的基础上过表达SPINK5可逆转由敲低PER1所导致的细胞表型。机制上，在AMC-HN-8细胞中过表达PER1可导致NF-κB表达水平发生同步改变，从而通过激活NF-κB通路促进SPINK5转录。结论 PER1通过NF-κB通路正向调控SPINK5转录，抑制HNSCC细胞增殖与迁移，提示PER1、SPINK5可能是HNSCC的潜在治疗靶点。
(8.0+极速模式)